ISOLASI DAN KARAKTERISASI SENYAWA METABOLIT ... - File UPI

Jurnal Sains dan Teknologi Kimia ISSN 2087-7412

Vol 1. No.2 Oktober 2010, Hal 191-199

ISOLASI DAN KARAKTERISASI SENYAWA METABOLIT SEKUNDER DARI FRAKSI AKTIF ANTIDIABETES DAGING BUAH PARIA (Momordica charantia Linn.) 1

Sri Mulyanti1*, Iqbal Musthapa, Siti Aisyah Jurusan Pendidikan Kimia, Fakultas Pendidikan Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pendidikan Indonesia, Jl. Setiabudi 229Bandung *) email: [email protected]

ABSTRAK Dampak buruk yang ditimbulkan dari obat-obatan sintesis untuk menangani penyakit diabetes mellitus telah menjadi alasan utama dilakukannya pencarian obat antihiperglikemia alami.Salah satu tumbuhan yang telah banyak dipercaya adalah buah Momordica charantiaL. Dari penelitiansebelumnya, telah diperoleh informasi fraksi yang memiliki efek antihiperglikemia yang cukup tinggi dibandingkan fraksi-fraksi lain, adalah fraksi n-heksana. Pada penelitian ini dilakukan beberapa teknik isolasi terhadap kandungan senyawa dari fraksi aktif antihiperglikemia daging buah Momordica charantia L. Isolasi dilakukan dengan menggunakan berbagai teknik kromatografi yang meliputi kromatografi cair vakum (KCV), kromatografi kinerja tekanan (KKT) dan kromatografi lapis tipis (KLT). Karakterisasi terhadap senyawa hasil isolasi mengggunakan spektroskori IR dan NMR 1D. Pada penelitian ini telah berhasil diisolasi dua senyawa yaitu B321 dan B35 yang merupakan senyawa golongan kukurbitan yang merupakan senyawa metabolit sekunder yang banyak terdapat pada buah paria. Kata kunci : Momordica charantia, diabetes mellitus, antihiperglikemia.

istilah kata Yunani, Diabetes yang berarti pancuran dan Mellitus yang berarti madu atau gula. Kurang lebih istilah Diabetes Mellitus menggambarkan gejala diabetes yang tidak terkontrol, yakni banyak keluar air seni yang manis karena mengandung gula. Oleh karena demikian, dalam istilah lain penyakit ini disebut juga “Kencing Manis”. Secara definisi medis, definisi diabetes meluas kepada suatu kumpulan aspek gejala yang timbul pada seseorang yang disebabkan oleh karena adanya peningkatan kadar glukosa darah akibat kekurangan insulin baik yang sifatnya absolut maupun relatif. Insulin adalah hormon yang diproduksi sel beta di pankreas, sebuah kelenjar yang terletak di belakang lambung yang berfungsi mengatur metabolisme glukosa menjadi energi, serta mengubah kelebihan glukosa menjadi glikogen yang disimpan di dalam hati dan otot. Tipe DM ada dua, yakni yang timbul akibat kekurangan insulin disebut dengan DM tipe 1 atau insulin dependent diabetes mellitus (IDDM) dan DM karena insulin tidak berfungsi dengan baik disebut dengan DM tipe 2 atau non-insulin

PENDAHULUAN Diabetes mellitus kini menjadi ancaman yang serius bagi manusia dan telah menjadi penyebab kematian urutan ke-7 di dunia. Di Indonesia sendiri penyandang diabetes mellitus diperkirakan mengalami peningkatan dari 8,4 juta jiwa pada tahun 2000 menjadi sekitar 21,3 juta jiwa pada tahun 2030 mendatang. Dan angka tersebut menempatkan Indonesia di peringkat ke-4 jumlah penyandang diabetes mellitus terbanyak di dunia setelah Amerika Serikat, India dan Cina. Ironisnya, 50% dari angka tersebut tidak tahu kalau mereka mengidap diabetes mellitus. Dan dari 50% yang tahu, hanya 30% yang rutin mengadakan pemeriksaan ke dokter. Menurut Kepala Instalasi Pelayanan Pelanggan dan Humas RSUP Persahabatan, Any Reputrawati, ”Meningkatnya penderita diabetes mellitus disebabkan oleh peningkatan obesitas, kurang aktivitas fisik, kurang mengkonsumsi makanan yang berserat, merokok dan tingginya lemak. Diabetes Mellitus merupakan salah satu penyakit tertua pada manusia. Berasal dari

191

Sri Mulyanti, Iqbal Mustapha, Siti Aisyah

J. Si . Tek. Kim.

dependent diabetes mellitus (NIDDM) (Ning Harmanto, 2004). Kajian literatur memperlihatkan bahwa beberapa tanaman yang dapat digunakan sebagai obat diabetes mellitus antara lain, daun, kulit batang, buah dan akar tanaman mahkota dewa (Phaleria macrocarpa), kemudian mengkudu (Morinda citrifolia) serta pare (Momordica charantia). Penelusuran pustaka melaporkan bahwa tanama pare dipercaya dapat menyembuhkan penyakit diabetes mellitus, dimana tanaman ini dilaporkan memiliki kandungan metabolit sekunder berupa saponin, flavonoid, polifenol, dan k a r o t e n.Se ny a wa s e ny a wai n idi du g ada pa tme r a ng s a ngp e r b a i k a n s e l s e lb e t a ,s e hi ngg ad a pa tme n i n gk a t k a np r o s e s p r o duk s ii n s ul i n( Ni ngHa r ma n t o ,200 4) . La po r a nl a p o r a n p e ne l i t i a n me mp e r l i ha t k a nb a hwaka j i a nt e r h a da pt a na ma n Momordica charantia ( Cuc ur b i t a c e a e )s e da ng d i l a k u k a n s e c a r a i nt e ns i fb e ka i t a n d e ng a n f un gs i ny as e b a g a is a l a hs a t ub a h a na l t e r na t i f u nt uk me ngo ba t i di a b e t e s me l l i t us ( Gr ov e r 2 003,Le a t h e r d a l ee ta l . ,1 98 1( Ni ngHa r ma nt o , 2 004, Pr a p a t iUt a mi ,200 3) . Pa da pe n e l i t i a n s e be l umny a t e l a h d i l a k u k a ne k s t r a k s id a nf r a k s i na s it e r ha da p d a g i ng b ua hp a r i a ,d a n dip e r o l e hb e b e r a p a e k s t r a k da nf r a k s i ,y a i t ue k s t r a k me t a n o l a i r , f r a k s i he k s a n, e t i l a s e t a t , da n b ut a no l . Be r da s a r k a np e ne l i t i a ny a ng t e l a h di l a k uk a n, t e l a hdi k e t a hu ib a hwaf r a k s iy a nga k t i fs e b a g a i a n t i hi p e r g l i k e mi ada r ida g i n gb ua hMomordica charantia L a da l a hf r a k s i he k s a n . Ha li ni d i t un j uk k a nda r iha s i luj ia n t i h i p e r g l i ke mi ay a ng d i l a k u k a n,di ma naf r a k s ihe ks a nme nun j u kk a n p e nur un a nk a da rg l uko s ad a r a hy a ng p a l i ng s i g ni f i ka n d a r i p a da f r a k s i y a ng l a i nny a ( Kus he r mi na Pr a t i wi ,2 009) .Ka r e n a ny a pa da p e ne l i t i a ni n ia k a n di l a k uk a np r os e si s o l a s i s e ny a wa mu r n i da r if r a k s ih e k s a n unt uk me ng e t a hui s e ny a wa y a n g t e r ka n dung d i d a l a mny a .

Bahan Kimia Pe ne l i t i a ni nime ngg una k a nb a ha n ut a ma da g i n gb ua hMomordica charantia Li n ny a n t e l a hdi k e r i ng a nda nd i h a l u s k a ns e b a ny a k5, 3 Kg .unt ukb a ha nba h a nk i mi ay a ngd i g una k a n t e r di r ida r ib a h a nt e k ni sda nba ha np r oa na l i s ( p . a ) . Ba h a n b e r k ua l i t a st e k n i s di de s t i l a s i t e r l e b i h da hul us e b e l um d i g una k a n.Ba ha n k i mi ay a ngdi g u na k a na da l a hme t a no l ,he k s a n, a s e t o n,e t i la s e t a t ,k l o r of o r m,a s e t o n,a q ua de s t , 3 0silica gel 60GF254for TLC,silica gel 602 40 0me s hfor CC.Kl o r of o r mt e r d e ut e r a s iun t u k a na l i s i sNMR. Peralatan Pa da p e r c o ba a ni ni di g una k a na l a t k a da r g ul a da r a h Op t i mum Ome ga, s pe k t r of o t ome t e r Ul t r a Vi o l e t Sp e c t r op ho t ome t e rShi ma dz u1 240,da nFo ur i e r Tr a ns f o r mI nf r aRe d( FTI R) . Ma s i ngma s i ng e k s t r a k di f r a k s i na s i de ng a nme ngg un a k a nKr oma t o g r a f iCa i rVa k um ( KCV)da n Kr oma t og r a f iFlash ( KF)de ng a n b e r ba ga ip e r b a n di nga nda nj e ni sp e l a r ut . Penyiapan Ekstrak dan Fraksi Ek s t r a k s idi l a k uk a nunt ukme mp e r o l e h e ks t r a k da r i Momordica charatia. Ek s t r a ks i di l a k uk a n de nga n me t o d e ma s e r a s it e r ha da p s e r b uk b u a hk e r i ng da l a m p e l a r ut me t a no l . Ek s t r a k me t a no ly a n g di p e r o l e h k e mud i a n di p e k a t ka nd e ng a n me ngg un a k a na l a trotary evaporator s e h i n gg a di pe r o l e he ks t r a k ke nt a l me t a no l . Ek s t r a k me t a no lk e nt a lk e mud i a n di e nc e r ka nde nga nme t a no ls a mpa iv o l ume50 0 mL.Ek s t r a k me t a no ll a l u di f r a k s i na s ide ng a n me ng g u na ka n pe l a r ut y a ng be r be d a k e po l a r a nny a .Se c a r abe r t ur ut t ur uthe k s a n ,da n e t i la s e t a t( de ng a np e na mba h a na i r ) .

HASIL DAN PEMBAHASAN Sa mp e ly a ng di g un a ka na da l a h da g i ng b ua h pa r i ak e r i ng . s e b a ny a k 800 g r a m di ma s e r a s i de ng a n me ngg un a k a n pe l a r ut me t a no ls e ba ny a k3× 1L ma s i ng ma s i ng2 4 j a m.Ha s i lma s e r a s idi p e r o l e he k s t r a kme t a no l b e r wa r n a h i j a u t ua ,e ks t r a k t e r s e b ut l a l u di p e k a t ka n da l a me v a p o r a t o rv a k um.Ek s t r a k me t a no ld i p e r o l e hs e b a ny a k47 , 5 3g r a m Te k ni k p e mi s a ha n da n pe mu r n i a n di l a k uk a n de ng a nk r oma t o g r a f ic a i rv a k um ( KCV) d a n KF. Ta h a pp e r t a ma p e mi s a ha n di l a k uk a nde nga nme ngg una k a nKCV,s e b e l um

BAHAN DAN METODE PERCOBAAN Bahan Tumbuhan Tumb uha nM. charantia di k ump u l k a npa da d a e r a h Ka mp u ng Pi p i s a n, I ndr a ma y u. Tumb uha ni nid i p i s a hka na nt a r ab ua hda nb i j i , k e mudi a nba g i a nb ua hdi i r i st i p i sda ndi j e murdi b a wa hs i na rma t a ha r is a mpa ik e r i ng .Ba g i a n b ua hy a ngk e r i n gk e mudi a ndi ha l us k a ns e hi ngg a d i p e r o l e hs e r b ukM. charantia.

192



d i l a k u k a np r o s e sKCVdi l a k uk a nt e r l e b i hda hu l u p e nc a r i a ne l ue ny a ngs e s u a ip a daKCV d e ng a n me ng g una ka n k r o ma t og r a f i l e mp e ng t i p i s ( KLT) . El ue n y a ng d i g una k a n me r u pa k a n p e l a r u to r g a ni ky a ngdi t i ng k a t k a nk e p o l a r a nny a s e c a r ag r a d i e n .Pe l a r uty a ng di g un a ka n pa da p e mi s a h a nf r a k s ih e k s a na da l a h he k s a n -e t i l a s e t a tde ng a nbe be r a p ak ompo s i s ip e r b a ndi ng a n. Be r da s a r k a na n a l i s ak r oma t og r a m KLT f r a ks i h e k s a np a d ae l u e nhe k s a nd a ne t i la s e t a td e ng a n b e be r a p a k a l i p e r b a ndi ng a n ma ka KCV d i l a k u k a n de nga n me ngg un a k a ne l ue n he k s a n d a ne t i la s e t a tde n g a nb e be r a p ape r ba n di ng a n y a i t uh e k s a n10 0% s e ba ny a k2k a l i ,he k s a n : e t i l a s e t a t4, 8: 0, 2s e b a ny a k3k a l i ;4 , 2 : 0 , 8s e b a ny a k 3k a l i ;3, 6: 1 , 4s e ba ny a k3k a l i ;3: 2s e ba ny a k2 k a l i ;2, 4 : 2 , 6s e b a ny a k2k a l i ;1 , 8 : 3 , 8s e b a ny a k2 k a l i ;1, 2 : 3 , 8s e b a ny a k2k a l i ,0, 6 : 4 , 4s e b a ny a k2 k a l id e ng a nv o l ume50 mL s e t i a pk a l ie l us i . KCV f r a k s i he ks a n de ng a n ma s s a4 g r a m me ng ha s i l ka n 22 f r a k s i de ng a n po l a k r o ma t o g r a ms e p e r t ip a da ga mba r 1 ,f r a ks i t e r s e b utdi a na l i s i sme ngg u na k a n KLT d e ng a n e l ue n he k s a ne t i la s e t a td e nga n pe r ba n di ng a n 3 : 2 .

Gambar 3.Kr o ma t o g r a m KLTf r a k s iga b ung a n KCVf r a ks ihe k s a n Te r ha da pf r a k s iB di l a k uk a npe mu r n i a n l e b i hl a n j u td e ng a nme ngg un a k a nKCV de ng a n di a me t e rk o l om y a ng l e b i h ke c i l . Se b e l um di l a k uk a np r o s e s KCV y a ng ke 2 di l a k uk a n t e r l e b i hda hu l up e nc a r i a ne l u e ny a ngs e s u a ipa d a KCV de n ga n me ngg u na k a n k r oma t og r a f i l e mp e ng t i p i s( KLT) .El ue ny a ng d i g una k a n me r u pa k a np e l a r uto r g a ni ky a ng d i t i ng k a t k a n k e po l a r a nny as e c a r ag r a di e n. Be r da s a r k a n a na l i s ak r oma t og r a m KLT f r a k s iB pa dae l ue n he k s a n da ne t i la s e t a tde ng a nb e be r a p a ka l i p e r ba nd i n g a nma k aKCVk e 2di l a k uk a nde ng a n me ng g u na ka ne l u e n he k s a n da ne t i la s e t a t de ng a nb e be r a p ap e r ba nd i n g a ny a i t uhe k s a n: e t i l a s e t a t9 , 5 : 0 , 5s e b a ny a k4k a l i ;9: 1s e b a ny a k4 k a l i ;8 , 5 : 1, 5s e b a ny a k2k a l i ;8 : 2s e b a ny a k4 k a l i ;7, 5 : 2 , 5s e b a ny a k4k a l i . Da r iha s i lp r o s e sKCV f r a k s iBd i p e r o l e h 20f r a k s i ,f r a k s it e r s e b utdi a na l i s i sme ngg u na k a n KLT de ng a ne l u e nh e k s a ne t i la s e t a tde ng a n p e r ba nd i n g a n8: 2.

Gambar 1. Kr oma t o g r a m KLTha s i lKCV f r a k s ihe ks a ns e t e l a hdi p a na s k a ndid a l a mov e n Fr a k s iy a ng me mi l i k ipo l ak r oma t o g r a m a ngs a madi ga b u ngk a nhi ngg a d e ng a nn i l a iRfy me n da p a t k a n5f r a ks ig a b ung a n.Ma s s a da r i ma s i ng ma s i ngf r a k s it e r s e b uta da l a hf r a k s iA ( 14) s e b a ny a k 0, 838 g r a m, f r a ks iB ( 5 ) s e b a ny a k1, 08 g r a m,f r a k s iC ( 67)s e b a ny a k 1 , 0 17 g r a m,f r a k s iD ( 817 )s e ba ny a k 0, 082 g r a m,da nf r a ks iE( 1 822)s e b a ny a k0, 0 91g r a m. Fr a ks i f r a k s ig a b un ga nd i a na l i s i sd e ng a nKLT me ng g una ka ne l ue nh e k s a ne t i la s e t a td e ng a n p e r ba ndi ng a n 3: 2. p o l a k r oma t og r a m d i t un j uk k a npa daga mba r2b e r i k u ti n i .

Gambar 4.Kr oma t o g r a mKLTh a s i lKCV f r a k s iBs e t e l a hdi p a na s k a ndio v e n Fr a ks iy a ngme mi l i k ipo l ak r o ma t o g r a m de ng a nni l a iRfy a ngs a madi g a b ung k a nhi ngg a me nda p a t k a n5f r a ks ig a b u ng a n .Ma s s a da r i ma s i n gma s i ngf r a k s it e r s e b uta da l a hf r a ks iB1 ( 1 5 )s e b a ny a k26 1mg ,f r a k s iB2( 69)s e b a ny a k 195mg ,f r a k s iB3( 1013)s e b a ny a k342mg , f r a k s iB4( 1 416)s e b a ny a k86mg ,da nf r a k s iB5 ( 1 720)s e ba ny a k36mg .Fr a k s i f r a k s ig a b ung a n di a na l i s i s de n g a n KLT me n gg un a ka ne l ue n

193


J. Si . Tek. Kim.

h e k s a ne t i la s e t a td e ng a np e r ba ndi ng a n3: 2.po l a k r o ma t o g r a md i t un j u k k a np a dag a mba r5b e r i k ut i ni .

g a b ung a ndi a na l i s i sde ng a nKLTme ngg una k a n e l u e nh e k s a ne t i la s e t a tde nga n pe r b a ndi ng a n 8: 2.p o l ak r oma t og r a m di t unj uk ka np a dag a mba r 8b e r i k uti ni .

Gambar 5. Kr oma t o g r a m KLTf r a k s iga b u ng a n KCVf r a ks iB Gambar 7.Kr oma t o g r a mha s i lKLTf r a k s iB35 di b a wa hl a mp uUV

Po l ak r oma t og r a m KLT f r a k s ig a b u nga n me mp e r l i ha t k a nba hwaf r a k s iB3me nga n dung s e ny a wa no da ma y or ,s e hi ngg af r a k s ii ni d i mur n i k a nl e b i hl a n j u td e ng a nKF.El u e ny a ng d i g una ka ni a l a h he k s a n :e t i la s e t a td e ng a n p e r ba ndi ng a n8, 5: 2 , 5,f r a k s iB3y a ngdi g u na k a n d a l a m KFme mi l i k ima s s a3 42mg .Ha s i lda r i p e mi s a h a n de ng a n KF d i d a pa t ka n 16 f r a k s i , s e t i a p f r a k s id i a na l i s i s me ngg un a k a n KLT d e ng a ne l u e n he k s a n -e t i la s e t a td e ng a n p e r ba ndi ng a n8: 2.p o l ak r oma t og r a m KLTha s i l KFdi t unj uk k a np a dag a mb a r6.

Gambar 4.8.Kr o ma t og r a m KLTf r a k s i g a b ung a nKFd a r if r a k s iB3 Po l a k r o ma t o g r a m f r a k s i B35 t e l a h me nunj uk ka np o l as e ny a way a ngs ud a hmur ni , unt ukp o l ak r oma t og r a m KLT f r a k s ig a b ung a n me mpe r l i ha t k a nb a hwaf r a k s iB3 2me nga n dun g s e ny a wa p o l a no da y a ng c uk up s e de r ha n a na mund e ng a nma s s ay a ngt i da kt e r l a l us e di k i t , s e hi ngg af r a k s ii ni d i mur ni k a nl e b i hl a nj ut de ng a n KF k e 2.El ue ny a n gdi g u na ka ni a l a h he k s a n :k l o r of o r md e nga np e r ba ndi ng a n 3: 7, f r a k s iB32y a ngdi g u na ka nda l a m KFme mi l i k i ma s s a52mg .Ha s i lda r ip e mi s a ha nd e ng a nKF di da p a t ka n7f r a k s i ,s e t i a pf r a k s id i a n a l i s i s me ng g u na ka n KLT de ng a ne l ue n he ks a ne t i l a s e t a t de ng a n pe r ba n di ng a n 2, 5: 7, 5 .p o l a k r oma t og r a m KLT ha s i lKF di t u nj uk ka npa d a g a mba r9.

Gambar 6.Kr oma t o g r a mKLTh a s i lKF f r a k s iB3 Fr a k s iy a ngme mi l i k ipo l ak r oma t og r a m d e ng a nn i l a iRfy a n gs a madi g a b u ngk a nhi ngg a me n da p a t k a n5f r a ks ig a b ung a n.Ma s s a da r i ma s i ng ma s i ngf r a k s it e r s e b uta da l a hf r a k s iB31 ( 13)s e ba ny a k99mg ,f r a k s iB3 2( 4 7)s e b a ny a k 5 8mg ,f r a k s iB33( 811 )s e b a ny a k12mg ,f r a ks i B34 ( 1216 )s e ba ny a k 4 mg ,d a nf r a k s iB35 s e b a ny a k 9 mg me r upa k a ne nd a pa nk r i s t a l b e r wa r n ap ut i hy a ngt e r b e n t ukda r if r a k s iB3. Unt ukf r a k s iB35d i l a k u ka nKLTt e r l e b i hda hu l u k a r e nadi du gas uda hmur ni ,ha s i lKLT t e r l i h a t p a da ga mba r 7 , s e l a nj ut ny a f r a k s i f r a ks i

194



I R f r a ks i B3 5 t e r l i ha tb a hwa f r a k s ii ni me mbe r i k a ns e r a pa ny a ngme nun j u kk a na da ny a s e r a p a nOH y a ngk ua tp a dab i l a ng a ng e l omb a ng a n gdi dug ab e r a s a ld a r ig ug us–OH 34 90, 9c m-1y p a da g ul a .Se l a i ni t uj ug ad i t e muk a na da ny a s e r a p a ny a ng k ua t pa d a pa nj a ng g e l omb a ng 29 33, 5c m-1 y a ngme r upa k a nv i b r a s iul ur– CH ns e r a pa nv i b r a s it e k ukCHp a dab i l a ng a n s p3da g e l omb a ng144 8, 4c m -1,y a ngd i d ug abe r a s a lda r i un i ta l i f a t i kp a dak e r a n gkat e r p e no i d.Se l a i ni t u j ug a t e r da p a ts e r a pa n C=C p a da b i l a ng a n g e l omb a ng 16 27, 8c m-1 ,y a ng me nu nj ukk a n a da ny ag ug u sf ung s ia l k e na ,s e t as e r a p a n CO p a da b i l a ng a ng e l o mba ng 1043 , 4c m-1 y a ng me nu nj uk ka na da ny ai k a t a nCOH a t a u COC. Be r da s a r k a nh a lt e r s e b utma kadi du g ap a daf r a ks i B35 t e r d a p a ts e ny a wa ut a ma y a ng me r upa k a n s e ny a wat e r p e no i db a i ky a ngt e r g l u ko s i l a s i .

Gambar 9.Kr oma t o g r a mKLTh a s i lKF f r a k s iB3 2 Da r i ha s i lp o l a k r oma t og r a m y a ng t e r l i h a t ,da p a tdi s i mp u l k a nb a hwa s a nny af r a ks i B32t i da kme ng a l a mip e mi s a h a n,ka r e nas e mua f r a k s iy a ngdi da pa tme mi l i k ipo l ak r oma t og r a m y a ngs a mape r s i s .Ke t i k as e muaf r a k s idi s a t uk a n k e mba l i ,di da p a tma s s a ny a be r k ur a ng s a mpa i t e r s i s as e b a ny a k2 6 mg ,s e hi ng ga di l a k uk a n p e mi s a h a n de nga n me ngg u na k a n KLT p r e pa r a t i f ,me r up a ka np r o s e sy a ng t i da kj a uh b e r be da de ng a n KLT y a ng s uda h di l a k uk a n, h a ny as a j ak r oma t og r a my a ngdi da pa tdi l a k uk a n p e ng e r i k a n p a d a p l a t da n di k e l ompo kk a n b e r da s a r k a nRfy a ngs a ma ,s e hi ngg adi p e r o l e h2 f r a k s i . Po l a k r oma t og r a m KLT ha s i l k r o ma t o g r a f i p r e p a r a t i f di t u nj uk k a n pa da g a mba r1 0.

Gambar 11. Sp e k t r u mFTI RFr a k s iB35 Analisa Spektum NMR 1H An a l i s i ss p e k t r ome t r it e r h a da pf r a ks i B3 5da nB3 21d i l a k u k a nu nt u kme ng e t a hui g a mba r a n be r ba g a ij e n i sa t o m hi dr og e n a pa t da l a m mo l e k u l .Sp e k t r um NMR 1H d me mbe r i k a ni nf o r ma s ime ng e n a il i ng k ung a n k i mi aa t om h i d r o ge n,j uml a ha t om hi dr og e n da l a ms e t i a pl i ng k ung a n ,d a ns t r uk t urg ug us y a ng be r de k a t a n de nga n s e t i a p a t om hi dr o g e n.Sp e k t r um NMR 1H f r a k s iB3 5 di t u n j u k k a npa d ag a mba r12.

Gambar 4.10.Kr oma t o g r a mha s i l KLTpr e p a r a t i ff r a k s iB32d i b a wa hl a mp uUV Di p e r o l e hf r a k s iB321s e b a ny a k4mgda n f r a k s iB322s e b a ny a k9mg .Fr a k s iB32 1s uda h me n unj uk k a np unc a ky a ngs e ny a way a ngmu r ni d i b a ndi ng k a nde nga nf r a k s it o t a l .B32 .

Identrifikasi Senyawa Hasil Isolasi Analisa Spektum FT-IR Un t u k me ng e t a h ui s e ny a wa y a ng t e r k a ndu ng da r if r a k s imur niy a ng d i p e r o l e h, di l a k uk a ni de n t i f i k a s id e nga ns pe k t r o s kop iFTI R. Ka r e na f r a k s i B321 s a ng a ts e di k i t , ma k a p e ng uk ur a n me ngg u na k a ns pe k t r o s kop i FTI R ha ny adi l a k uk a np a daf r a ks iB3 5.Pa das pe k t r um

a ks iB35 Gambar 12 Sp e k t r umNMR1HFr

195


Sp e k t r um NMR 1H f r a k s i B35 me mpe r l i ha t k a ns e j uml a hs i ny a ly a ng munc u l p a dage s e r a nk i mi a ;0, 661, 58y a ngk h a sunt uk g u g usCH3,2, 272, 28y a ngk ha sun t u kp r o t o n y a ng t e r i ka tp a da k a r bo ny a ng t e r i k a tpa da he t e r oa t om,da n 3, 51 5 , 3 5y a ng k ha sunt uk p r o t o ny a ng t e r i ka tp a da a t om k a r bo ny a ng b e r i k a t a nr a ngk a p .Pa dag e s e r a n5, 15d a n5 , 35 y a ngme mi l i k imu l t i p l i s i t a ss i ng l e tme nun j u kk a n a d a ny aa t om H y a ngt e r i k a tp a daka r bo ny a ng b e r i k a t a nr a ng k a p ,ma kadi p e r k i r a k a ns t r uk t u r s e ny a wa da r iB35 me mi l i k ii k a t a nr a ng ka p , s e d a ngk a n pa da ge s e r a n 4 , 7 2 da n 4, 63 me r up a k a n2a t o m Hy a ngbe r a s a lda r ime t i l e n a ngme mi l i k imul t i p l i s i t a ss i ng l e tda n ( =CH2)y i nt e g r i t a s ma s i ngma s i ng s a t u d a n di dug a me r up a k a ng ug us me t i l e nt e r mi na l ,s e hi ngg a da pa td i d ug as e ny a waB35me r up a ka ngo l o ng a n t e r p e no i dy a i t ut r i t e r p e ny a ngda p a tbe r u paj e n i s b e r up a k uk ur b i t a n ma up u n s t e r o i d y a ng me mi l i k ii k a t a nr a ngk a pda n me t i l e nt e r mi n a l p a da k e r a ng k as t r uk t ur ny ad a nt i da ka d a ny a g u g us me t o k s ik a r e na t i da kt e r da pa tg e s e r a n p a da0. 3 5y a ngc uk upt i ng g i .

J. Si. Tek. Kim.

trans da ns a l i n g cis s e hi ngg a da pa tme ng ua t k a n dug a a nb a hwa s a ny as e ny a wa t e r s e b u tt e r ma s uk go l o ng a nk uk ur b i t a n.Ka r e nama s i hdi b ut uhk a nuj i k a r a k t e r i s a s il e b i h l e ngka p l a g i unt uk da p a t me ma s t i k a ns t r uk t urda r is e ny a waB321.Be b e r a p a s t r u k t urs e ny a wag o l o ng a nk i k ur b i t a ny a ngme mi l i k i r a ngk a py a ngt e r d a p a tduap r o t o ny a ngs a l i ngtrans da ns a l i ngcis di a nt a r a ny a ;( 19R, 28E) 5 β, 19Ep o ks i 19me t ok s i k uk ur b i t a 6, 2 3t i e n 3 β, 3 5di o l ( 1) , ( 19R, 2 8E) 5 β, 1 9Ep o k s i 1 9, 25me t ok s i k uk ur b i t a 6, 23t i e n3βo l ( 2) , ( 19R, 2 8 E) 5β , 19 Ep o k s i 19 me t ok s i k uk u r b i t a 6, 23 , 2 5t i e n3βo l( 3) ( Sy a ms ul a r i f i n,200 7 ) .

H 3CO H 3 CO

OCH 3 OH

O

O

HO 2

HO 1

H3CO O HO 3

Gambar 14 Pe r k i r a a nt r uk t urs e ny a waB3 21 Analisa Spektum NMR 13C Spektrum NMR 13C dekopling Fraksi B35 Pa d ap e ng u k ur a nNMR13Cde k op l i ng da r if r a k s i B3 5 di p e r o l e hs p e k t r um pa da g a mba r15 . Gambar 13 Sp e k t r umNMR1HFr a ks iB321 Sp e k t r um NMR1Hf r a k s iB321me mpe r l i ha t k a n s e j uml a hs i ny a ly a ngmunc ul .Ya i t u ;0, 83 1 , 3 1y a ng k ha sun t u kg ug usCH3,2, 122, 33y a ngk h a sunt uk p r o t o ny a ngt e r i k a tpa d ak a r bo ny a n gt e r i k a tpa da he t e r oa t om,da n3, 40 6 , 0 4y a ngk ha sun t u kp r o t o n y a ng t e r i k a tp a da a t o m k a r bo ny a ng b e r i k a t a n r a ngk a p .Pa dage s e r a n6, 0 4da n5 , 6 3y a ngme mi l i k i i n t e g r i t a sma s i ng ma s i ng s a t u,da r ida t ako ns a n t a ko p l i ng ny adi dug ak e d uap un c a kt e r s e b utme r up a k a n duap r o t o ny a ngs a l i ngtrans, da np a d ag e s e r a n4, 71 da n4 , 63di dug ame r up a ka nd uap r o t o ny a ngs a l i ng cis.Ma ka da p a td i d ug as t r uk t urs e ny a wa B321 me r upa k a ng o l o nga nt e r pe n o i dy a i t ut r i t e r p e nde ng a n a da ny ap unc a ky a ngs a ng a tr a p a tda ni nt e g r i t a sy a ng b a ny a kp a dag e s e r a n0, 831, 55 .d a p a tdi p e r k i r a k a n j u g as e ny a wa i ni me r up a k a n j e n i sk uk u r b i t a n ma up uns t e r o i d ,s e da ngka nda r ii nf o r ma s is pe k t r um NMR p r o t o n,b a hwa s a ny as e ny a waB3 21me mi l i k i i k a t a nr a ngka py a ngt e r da p a tdu ap r o t o ny a ngs a l i ng

Gambar 15 Sp e k t r umNMR13CFr a k s iB35 Pa das p e k t r um k a r b o ni ni ,s p e k t r um t e l a h me l e wa t ip r o s e sd e kop l i ng ,s e hi ngg a h a ny at e r l i ha tp unc a k p unc a kda l a mk o ndi s i s i ng l e t .Da r is p e k t r um t e r s e b utda p a tt e r l i ha t b a hwa s a ny a s e ny a wa p a da f r a k s i B35 me ng a nd unga t o mk a r bo n( C)s e ba ny a k30 a t om da nt i da kt e r ma s uk p unc a k pe l a r ut a da ge s e r a n7 6, 9577, 46 ,da ni t u CDCl 3 p me r u pa k a nj u ml a ha t o my a ngt e r d a p a tpa da

196



k e r a n gkada s a rs e ny a wada l a mb u a hp a r i a y a i t uk uk ur b i t a n( C30 )y a n gt e l a hme ng a l a mi mo d i f i k a s i ,k e r a ng k ada s a rk uk ur b i t a ny a ng me r up a k a nme t a b o l i ts e k u nde ry a ngb a ny a k t e r da pa tp a dab ua hpa r i at e r l i ha tp a dag a mba r 16 .

s p e k t r um i nime r up a ka np unc a ka t om ka r bo n k ua r t e ne r( Cq)y a i t us e b a ny a k6.

21 22 24 26 18 20 25 23 12 17 11 27 13 1 14 16 9 2 15 8 10 197 30 3 4 5 6 28 29

Gambar 16 Ke r a ngk ada s a rs t r uk t urs e ny a wak uk ur b i t a n Gambar 18 Sp e k t r umNMR13CDEPT135 Fr a ks iB35

Spektrum NMR 13C DEPT 90 Fraksi B35 Sp e k t r um 13C DEPT 90p a d aga mb a r 4. 18 ,t e r d a p a t 18 p u nc a k a t om C y a ng me r up a k a nj e n i sCH da n CH2. d a r as pe k t r um t e r s e b ut ,d a pa tdi p e r o l e hi n f o r ma s ij uml a hme t i n da nme t i l e ns e ba ny a k1 8.

Da r is e k i a nd a t as pe k t r umNMR13C, ma k ad a p a td i s i mp ul k a nj e ni sg ug u sk a r bo na pa s a j abe s e r t aj u ml a hny ay a ngt e r a ngk umda l a m t a b e l1 Tabel 1.Da t aj uml a ha t o mk a r b o nda nj e ni s ny a Jenis 13C

jumlah

CH3

6

CH2

8

CH

1 0

Cq

6

Se t e l a h me ne l a a h d a t a - d a t a k a r a k t e r i s a s i s e ny a wa B3 5, ma k a da pa t d i s i mp ul k a n b a hwa s a ny a s e ny a wa B35 me r u pa k a ns e ny a waj e ni sk uk ur b i t a ny a ngt e l a h me ng a l a mi mo di f i k a s i pa d ag ug u s g ug us ny a , d i a n t a r a ny a ,t e r da p a t ny a 1 i ka t a n r a ngk a p t a mba h a ny a i t ume t i l e nt e r mi na lp a dag e s e r a n 1 11p pm y a ngbe r a dap a dap os i s ib a g i a nba wa h p a das p e k t r um 13C DEPT 1 35,a da ny ag e s e r a n 7 6, 93 ( Cq) ,5 6 , 96 ( CH)da n42, 22( CH2)da n t i da ka da ny aka r bo nme t ok s is e p e r t it e r l i h a tp a da s p e k t r um p r o t o n.De nga nda t a da t at e r s e b utda n d i b a ndi ng k a n de ng a ns e ny a wa s e ny a wa y a ng t e l a hb e r ha s i ldi p e r o l e hd a r id a g i ngb u a hpa r i a , ma k adi dug as t r uk t u rd a r is e ny a waB35a da l a h ( 2 3E) 3βHi dr ok s i 7βme t o ks i k uk ur b i t a 5 , 2 3 , 2 5t i e n 1 9a l( 4 )( y a ngt i da kme nga n dung g ug usa l de hi d)k a r e nat i da kt e r da pa tp i t as e r a p a n

Gambar 17 Sp e k t r umNMR13CDEPT9 0 Fr a ks iB35 Spektrum NMR 13C DEPT 135 Fraksi B35 Sp e k t r um NMR 13C DEPT 135 me mun c ul k a na t o m ka r b o nj e ni sCH3 da nCH p a dapo s i s idia t a sga r i sy a ngb e r j uml a h1 6da n CH2 pa d a po s i s idi b a wa hg a r i sb e r j uml a h8 . s e d a ngk a np unc a ky a ng t i da k mun c ulpa da

197


J. Si . Tek. Kim.

k a r bo ni l( C=O) p a da s pe k t r um I R a t a u ( 19 R, 2 8 E) 5β, 19Ep ok s i 19me t ok s i k uk ur b i t a 6 , 2 3 , 2 5t i e n3 βo l( 5)( Sy a ms u la r i f i n,200 7) ( y a ngt i d a kme ng a n dungg ug usme t o k s i )k a r e na t i da kt e r d a p a tge s e r a np a da0 . 3 5y a ng c uk up a ngt e r l i ha tpa da t i ng g ipa das p e k t r umNMR1Hy g a mba r1 9.

6, 23 , 25t i e n 3 βo l ( 3 ) . Se da ng k a n s t r uk t ur s e ny a wada r if r a k s iB3 5di dug as t r uk t ura d a l a h ( 2 3E) 3β Hi dr ok s i 7βme t o k s i k uk ur b i t a 5, 23 , 25t i e n 1 9a l( 4)( y a ngt i da kme nga n dun g g ug usa l de h i d )k a r e n at i da kt e r da pa tp i t as e r a p a n k a r bo ni l( C=O) p a da s p e k t r um I R a t a u ( 1 9R, 2 8 E) 5β, 19 Ep ok s i 19me t ok s i k uk ur b i t a 6, 23 , 25t i e n 3 βo l( 5 )( Sy a ms ula r i f i n ,200 7) ( y a ngt i d a kme ng a nd ungg ug usme t o k s i ) .

H 3 CO

DAFTAR PUSTAKA

OHC O O

Ac hma d, Sj a ms ul Ar i f i n, d k k .( 2007 ) .“ Ilmu Kimia dan Kegunaan TumbuhTumbuhan Obat Indonesia” .Ba nd ung: I TB

HO 5

HO 4

Gambar 4.20 Pe r k i r a a ns t r u k t urs e n y a waB35 An o ni m.( 200 9) .Diabetes Mellitus.[ On l i ne ] . Te r s e di a : me k a r wi j a y a . b l og s p o t . c o m/ 20 09/ 01/ d i a b e t e s me l l i t u s .[ 13J ul i200 9] .

St r u k t u rt e r s e b u t ma s i hb e l um b i s a s e p e nuh ny a be n a r , ka r e na b e l um a da ny a i nf o r ma s i da r i NMR 2 D, k a r e n ap e r o l e ha n s a mp e ly a n gs a nga ts e di k i ts e hi ng g aa da ny a k e t e r b a t a s a n pe n g uk u r a n unt uk p e ng uj i a n k a r a k t e r i s a s il e b i hl a nj ut .Be g i t uj u g ad e ng a n p e ng uj i a n a k t i v i t a s , ka r e na ny at i da k da pa t d i k e t a h uia p a ka hs e ny a wada r if r a k s ia k t i fy a ng d i p e r o l e h me mi l i k ia k t i f i t a sa nt i hi p e r g l i k e mi a y a ngt i n g g is e p e r t if r a k s is e mul aa t a ut i da k

Bu c k i ng ha m J( Ed. ) , 200 6 . Dictionary of Natural Products on CD Rom,Cha pma n & Ha l l / CRC. Gr ov e re ta l . ( 2 004) .Pha r ma c o l o g i c a la c t i o na nd po t e nt i a lu s e so f Momordica charantia. Journal of Etnopharmacology. 88, p p 10711 1.

KESIMPULAN I s o l a s is e ny a wame t a bo l i ts e k un de rda r i f r a k s ia k t i fda g i ngb ua hMomordica charantria Ld e nga nb e r b a ga it e k n i kk r oma t og r a f iy a ng me l i p ut ik r oma t og r a f ic a i rv a k um,k r oma t og r a f i Flash,d a nk r oma t og r a f il a p i st i p i sdi p e r o l e hdu a s e ny a wa ,y a i t us e ny a wada r if r a k s iB321da n d a r if r a k s iB35 ,y a ngme mi l i k ik a r a k t e ry a ng mi r i p de nga n g o l o nga n t r i t e r p e n. Se t e l a h d i l a k u k a n t e l a a h t e r ha d a p ha s i l a na l i s i s s p e k t r o s ko p iFT I R da n NMR,ma k a da p a t d i k e t a h ui pe r k i r a a ns t r uk t u rs e ny a wa y a ng d i p e r o l e h da r if r a k s ia k t i fa nt idi a b e t e sb ua h p a r i a me r u pa ka ns e ny a wa y a ng t i da kj a uh b e r be dade ng a ns e ny a waj e ni sk uk ur b i t a ny a ng b a ny a k t e r ka nd ung da l a m b ua h pa r i a . Ba hwa s a ny as e ny a wa B321 me mi l i k ii k a t a n r a n gk a py a ngme mi l i k id uap r o t o ny a ngs a l i ng trans d a ns a l i n gcis.Be b e r a pas t r uk t urs e ny a wa g o l o ng a nk i k ur b i t a ny a ng me mi l i k ir a ngk a p y a ngt e r da p a tdu ap r o t o ny a ngs a l i n gtrans da n s a l i ngcis di a nt a r a ny a ;( 19R, 28E) 5 β, 19Ep o ks i 1 9me t o k s i k uk u r b i t a 6, 23t i e n3β, 35di o l ( 1) , ( 19 R, 2 8 E) 5β, 19Ep ok s i 19, 25 me t ok s i k u k ur b i t a 6, 23t i e n3 βo l ( 2) , ( 19 R, 2 8 E) 5β, 19Ep ok s i 19me t ok s i k uk ur b i t a -

Ha r d j o n oSa s t r o ha mi dj o j o .( 1992 ) .Spektroskopi inframerah. Yo gy a k a r t a : LI BERTY YOGYAKARTA Ha r woo d,L.M.( 19 99) .‘ Dry flash’ column chromatographi. [ Onl i n e ] . Te r s e di a : www. e r o wi d . o r g / a r c h i v e / r ho di um/ c t r y / e q ui pme nt / p i c t u r e s / dr y f . [ 8 De s e mb e r 2008 ] J i m Cl a r k .( 20 07) .Kromatografi Lapis Tipis. [ On l i ne ] . Te r s e d i a : www. c he mi s t r y . o r g[ 12Nov e mb e r20 09] . Ka r , Aj i t . Et al. ( 2003 ) . “ Comp a r a t i v e Ev a l ua t i o nofHy pog l y c a e mi cAc t i v i t y of Some I ndi a n Me i c i na lPl a nt si n Al l o x a n Di a b e t i c Ra t ” . Journal of Ethnopharmacology.8 4 , 1 0510 8 Ku s he r mi na Pr a t i wi .( 200 8) . Isolasi Dan Identifikasi Fraksi Aktif Antidiabetes Dari Daging Buah Paria (Momodica charantia L.). Ba nd ung : J ur u s a n Pe nd i d i k a nKi mi aFPMI PAUPI

198



charantia L. ” . Chemical and Pharmaceutical Buletin. 49,5 463.

Mul ho l l a nd, Du l c i e . ( 199 7 ) . “ Cuc u r b i t a ne Tr i t e r p e no i d s Fr om The Le a v e s Of Momordica foetida”.Phy t o c he mi s t r y . 45,39 1395.

Ni ng Ha r ma nt o .( 2 004) .Menumpas Diabetes Mellitus bersama Mahkota Dewa. De p ok :PT. Ag r ome d i aPu s t a k a .

Mur a ka mi ,T,et al.( 2 001) .“ St r uc t ur e so fNe w Cuc ur b i t a ne Ty pe Tr i t e r p e ne Gl y c o s i de s ,Goy a g l y c o s i de s a , b , c ,d, e ,f ,g ,a nd–h,a ndNe w Ol e a na n e Ty pe Tr i t e r pe ne Sa p o ni ns , Goy a s a po ni nsI ,I I ,a ndI I I ,f r o m The Fr s e h Fr ui to fJ a p a ne s e Momordica

Pr a pa t iUt a mid a nTi m Le nt a r a . 200 3. Tanaman Obat untuk mengatasi Diabetes Melitus. J a k a r t a : PT. Ag r ome di aPus t a k a Se i ko uNa k a mur a , et al,Chem. Pharm. Bull. , 54, 1545 1 550( 2 00 6)

199